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  (¾<?xml version="1.0"?><Features nextValidID="17"><Feature recentID="16" name="tet operator" type="protein_bind" allowSegmentOverlaps="0" consecutiveTranslationNumbering="1"><Segment range="4849-4867" color="#31849b" type="standard"/><Q name="bound_moiety"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;tetracycline repressor TetR&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="gene"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;i&gt;tetO&lt;/i&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;bacterial operator O&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt; for the &lt;i&gt;tetR&lt;/i&gt; and &lt;i&gt;tetA&lt;/i&gt; genes&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q></Feature><Feature recentID="15" name="T7Te terminator" type="terminator" allowSegmentOverlaps="0" consecutiveTranslationNumbering="1"><Segment range="9125-9152" color="#ffffff" type="standard"/><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;phage T7 early transcription terminator&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q></Feature><Feature recentID="14" name="tetR/tetA promoters" directionality="3" type="promoter" allowSegmentOverlaps="0" readingFrame="-1" consecutiveTranslationNumbering="1"><Segment range="4813-4868" color="#ffffff" type="standard"/><Q name="gene"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;i&gt;tetR&lt;/i&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;overlapping promoters for bacterial&amp;nbsp;&lt;i&gt;tetR&lt;/i&gt; and &lt;i&gt;tetA&lt;/i&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q></Feature><Feature recentID="13" name="rrnB T1 terminator" type="terminator" allowSegmentOverlaps="0" consecutiveTranslationNumbering="1"><Segment range="9038-9109" color="#ffffff" type="standard"/><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;transcription terminator T1 from the &lt;i&gt;E. coli rrnB&lt;/i&gt; gene&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q></Feature><Feature recentID="12" name="Cas9" directionality="1" translationMW="157883.99" type="CDS" allowSegmentOverlaps="0" consecutiveTranslationNumbering="1" maxRunOn="9010" maxFusedRunOn="9010" detectionMode="exactProteinMatch"><Segment range="4904-8990" color="#993366" type="standard" translated="1"/><Q name="codon_start"><V int="1"/></Q><Q name="locus_tag"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;br&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;generates RNA-guided double strand breaks in DNA&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="product"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;Cas9 (Csn1) endonuclease from the&amp;nbsp;&lt;i&gt;Streptococcus pyogenes&lt;/i&gt;&amp;nbsp;Type II CRISPR/Cas system&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="protein_id"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;br&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="transl_table"><V int="1"/></Q></Feature><Feature recentID="11" name="SacB" directionality="2" translationMW="52961.06" type="CDS" swappedSegmentNumbering="1" allowSegmentOverlaps="0" cleavageArrows="4724" readingFrame="-1" consecutiveTranslationNumbering="1" hitsStopCodon="1"><Segment range="3390-4724" color="#993366" type="standard" translated="1"/><Segment name="signal peptide" range="4725-4811" color="#993366" type="standard" translated="1"/><Q name="codon_start"><V int="1"/></Q><Q name="gene"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;i&gt;Bacillus subtilis sacB&lt;/i&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;negative selection marker&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="product"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;secreted levansucrase that renders bacterial growth sensitive to sucrose&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="protein_id"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;br&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="transl_table"><V int="1"/></Q></Feature><Feature recentID="10" name="Shine-Dalgarno sequence" type="RBS" allowSegmentOverlaps="0" consecutiveTranslationNumbering="1"><Segment range="1227-1235" color="#a6acb3" type="standard"/><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;full consensus sequence for ribosome-binding sites upstream of start codons in &lt;i&gt;E. coli&lt;/i&gt;; complementary to a region in the 3' end of the 16S rRNA (&lt;a href=&quot;https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/7528374&quot; title=&quot;https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/7528374&quot;&gt;Chen et al., 1994&lt;/a&gt;)&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q></Feature><Feature recentID="9" name="AmpR promoter" directionality="2" type="promoter" swappedSegmentNumbering="1" allowSegmentOverlaps="0" consecutiveTranslationNumbering="1"><Segment range="11958-12062" color="#ffffff" type="standard"/><Q name="gene"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;i&gt;bla&lt;/i&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q></Feature><Feature recentID="8" name="pSC101 ori" type="rep_origin" swappedSegmentNumbering="1" allowSegmentOverlaps="0" consecutiveTranslationNumbering="1"><Segment range="10253-10475" color="#ffff00" type="standard"/><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;low-copy replication origin that requires the Rep101 protein&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q></Feature><Feature recentID="7" name="Î» tL3 terminator" type="terminator" swappedSegmentNumbering="1" allowSegmentOverlaps="0" readingFrame="-1" consecutiveTranslationNumbering="1"><Segment range="3129-3373" color="#ffffff" type="standard"/><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;transcription terminator &lt;i&gt;t&lt;/i&gt;&lt;sub&gt;L3&lt;/sub&gt; from phage&amp;nbsp;Î»&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q></Feature><Feature recentID="6" name="araBAD promoter" directionality="1" type="promoter" allowSegmentOverlaps="0" consecutiveTranslationNumbering="1"><Segment range="916-1200" color="#ffffff" type="standard"/><Q name="gene"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;i&gt;araBAD&lt;/i&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;promoter of the L-arabinose operon of &lt;i&gt;E. coli&lt;/i&gt;; the &lt;i&gt;araC&lt;/i&gt; regulatory gene is transcribed in the opposite direction (&lt;a href=&quot;http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/7608087&quot; title=&quot;http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/7608087&quot;&gt;Guzman et al., 1995&lt;/a&gt;)&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q></Feature><Feature recentID="5" name="Gam" directionality="1" translationMW="16346.32" type="CDS" allowSegmentOverlaps="0" consecutiveTranslationNumbering="1" hitsStopCodon="1"><Segment range="1244-1660" color="#ff0000" type="standard" translated="1"/><Q name="codon_start"><V int="1"/></Q><Q name="gene"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;i&gt;gam&lt;/i&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;protects the double-stranded DNA substrate for recombination&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="product"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;inhibitor of the host RecBCD nuclease in the&amp;nbsp;Î» Red system&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="transl_table"><V int="1"/></Q></Feature><Feature recentID="4" name="Exo" directionality="1" translationMW="25908.66" type="CDS" allowSegmentOverlaps="0" consecutiveTranslationNumbering="1" hitsStopCodon="1"><Segment range="2448-3128" color="#ff0000" type="standard" translated="1"/><Q name="codon_start"><V int="1"/></Q><Q name="gene"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;i&gt;exo&lt;/i&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;creates 3' single-stranded DNA tails&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="product"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;5' to 3' double-stranded DNA exonuclease in the&amp;nbsp;Î» Red system&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="transl_table"><V int="1"/></Q></Feature><Feature recentID="3" name="Beta" directionality="1" translationMW="29688.72" type="CDS" allowSegmentOverlaps="0" consecutiveTranslationNumbering="1" hitsStopCodon="1"><Segment range="1666-2451" color="#ff0000" type="standard" translated="1"/><Q name="codon_start"><V int="1"/></Q><Q name="gene"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;i&gt;bet&lt;/i&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;mediates pairing of a single-stranded DNA with a complementary target&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="product"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;single-stranded DNA binding recombinase in the&amp;nbsp;Î» Red system&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="transl_table"><V int="1"/></Q></Feature><Feature recentID="2" name="AmpR" directionality="2" translationMW="31557.36" type="CDS" swappedSegmentNumbering="1" allowSegmentOverlaps="0" cleavageArrows="11888" readingFrame="-1" consecutiveTranslationNumbering="1" hitsStopCodon="1" detectionMode="exactProteinMatch"><Segment range="11097-11888" color="#ccffcc" type="standard" translated="1"/><Segment name="signal sequence" range="11889-11957" color="#ccffcc" type="standard" translated="1"/><Q name="codon_start"><V int="1"/></Q><Q name="gene"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;i&gt;bla&lt;/i&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and related antibiotics&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="product"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;Î²-lactamase&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="transl_table"><V int="1"/></Q></Feature><Feature recentID="1" name="araC" directionality="2" translationMW="33383.97" type="CDS" swappedSegmentNumbering="1" allowSegmentOverlaps="0" readingFrame="-1" consecutiveTranslationNumbering="1" hitsStopCodon="1"><Segment range="11-889" color="#993366" type="standard" translated="1"/><Q name="codon_start"><V int="1"/></Q><Q name="gene"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;i&gt;araC&lt;/i&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="product"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;L-arabinose regulatory protein&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="transl_table"><V int="1"/></Q></Feature><Feature recentID="0" name="Rep101" directionality="2" translationMW="37374.30" type="CDS" swappedSegmentNumbering="1" allowSegmentOverlaps="0" readingFrame="-1" consecutiveTranslationNumbering="1" hitsStopCodon="1"><Segment range="9255-10205" color="#993366" type="standard" translated="1"/><Q name="codon_start"><V int="1"/></Q><Q name="gene"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;i&gt;rep101&lt;/i&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="product"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;RepA protein needed for replication with the pSC101 origin&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="transl_table"><V int="1"/></Q></Feature></Features>
   —<?xml version="1.0"?><Primers nextValidID="0"><HybridizationParams minContinuousMatchLen="10" allowMismatch="1" minMeltingTemperature="40"/></Primers>
  @<Notes>
<UUID>93936cc4-6e7e-41ce-b0a9-9126f03cd508</UUID>
<Type>Synthetic</Type>
<ConfirmedExperimentally>0</ConfirmedExperimentally>
<Created UTC="10:7:8">2018.10.19</Created>
<LastModified UTC="6:7:57">2021.2.22</LastModified>
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</Notes>
  <StrandColors><TopStrand><ColorRange range="4930..4930" colors="red"/><ColorRange range="7420..7421" colors="red"/></TopStrand><BottomStrand><ColorRange range="4930..4930" colors="red"/><ColorRange range="7420..7421" colors="red"/></BottomStrand></StrandColors>  DÊ     û  /$        /$Ûša×¡Ã�¶·ªºÝ|7ììð�ª¥góY†ËUõÚ1ñÂd6ð ŽÕM:Ïƒ†r‚û3Ó¥å¿—ŽF!ÑÌpÇSWcˆÇ81›U£‹�B8bxu>ÌŸÆ›ÛÊ[:ö3Í%ÖŽÔÑ©³ÓNñdÏëþ�Ã)a¨ý]8V0àŒëoüšY¡ÃÒ”ö¶=$30qRW÷‚ö³ï|’[»àÀ]5Y·ð°ÕÕ®Ëøj­÷ÿ‡ÌX!f_«kôÂÂÆUVÄeòƒíl2•ü÷Ñ€ÚWoÃM mª3­=ž«g¿=­E}h½š6ÑÚ<·Œº§ƒºìåõ|%ÿ:iTÚâ]SõOaÕ\ÉuR.e·KÝ¡¦£pËw¨æ=“j¦öQ¤Á¾~ê¦Í{¹â®ö*ªk¹A
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  (¾<?xml version="1.0"?><Features nextValidID="17"><Feature recentID="16" name="tet operator" type="protein_bind" allowSegmentOverlaps="0" consecutiveTranslationNumbering="1"><Segment range="4849-4867" color="#31849b" type="standard"/><Q name="bound_moiety"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;tetracycline repressor TetR&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="gene"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;i&gt;tetO&lt;/i&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;bacterial operator O&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt; for the &lt;i&gt;tetR&lt;/i&gt; and &lt;i&gt;tetA&lt;/i&gt; genes&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q></Feature><Feature recentID="15" name="T7Te terminator" type="terminator" allowSegmentOverlaps="0" consecutiveTranslationNumbering="1"><Segment range="9105-9132" color="#ffffff" type="standard"/><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;phage T7 early transcription terminator&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q></Feature><Feature recentID="14" name="tetR/tetA promoters" directionality="3" type="promoter" allowSegmentOverlaps="0" readingFrame="-1" consecutiveTranslationNumbering="1"><Segment range="4813-4868" color="#ffffff" type="standard"/><Q name="gene"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;i&gt;tetR&lt;/i&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;overlapping promoters for bacterial&amp;nbsp;&lt;i&gt;tetR&lt;/i&gt; and &lt;i&gt;tetA&lt;/i&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q></Feature><Feature recentID="13" name="rrnB T1 terminator" type="terminator" allowSegmentOverlaps="0" consecutiveTranslationNumbering="1"><Segment range="9018-9089" color="#ffffff" type="standard"/><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;transcription terminator T1 from the &lt;i&gt;E. coli rrnB&lt;/i&gt; gene&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q></Feature><Feature recentID="12" name="Cas9" directionality="1" translationMW="157883.99" type="CDS" allowSegmentOverlaps="0" consecutiveTranslationNumbering="1" maxRunOn="9001" maxFusedRunOn="9001" detectionMode="exactProteinMatch"><Segment range="4904-8990" color="#993366" type="standard" translated="1"/><Q name="codon_start"><V int="1"/></Q><Q name="locus_tag"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;br&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;generates RNA-guided double strand breaks in DNA&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="product"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;Cas9 (Csn1) endonuclease from the&amp;nbsp;&lt;i&gt;Streptococcus pyogenes&lt;/i&gt;&amp;nbsp;Type II CRISPR/Cas system&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="protein_id"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;br&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="transl_table"><V int="1"/></Q></Feature><Feature recentID="11" name="SacB" directionality="2" translationMW="52961.06" type="CDS" swappedSegmentNumbering="1" allowSegmentOverlaps="0" cleavageArrows="4724" readingFrame="-1" consecutiveTranslationNumbering="1" hitsStopCodon="1"><Segment range="3390-4724" color="#993366" type="standard" translated="1"/><Segment name="signal peptide" range="4725-4811" color="#993366" type="standard" translated="1"/><Q name="codon_start"><V int="1"/></Q><Q name="gene"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;i&gt;Bacillus subtilis sacB&lt;/i&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;negative selection marker&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="product"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;secreted levansucrase that renders bacterial growth sensitive to sucrose&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="protein_id"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;br&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="transl_table"><V int="1"/></Q></Feature><Feature recentID="10" name="Shine-Dalgarno sequence" type="RBS" allowSegmentOverlaps="0" consecutiveTranslationNumbering="1"><Segment range="1227-1235" color="#a6acb3" type="standard"/><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;full consensus sequence for ribosome-binding sites upstream of start codons in &lt;i&gt;E. coli&lt;/i&gt;; complementary to a region in the 3' end of the 16S rRNA (&lt;a href=&quot;https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/7528374&quot; title=&quot;https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/7528374&quot;&gt;Chen et al., 1994&lt;/a&gt;)&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q></Feature><Feature recentID="9" name="AmpR promoter" directionality="2" type="promoter" swappedSegmentNumbering="1" allowSegmentOverlaps="0" consecutiveTranslationNumbering="1"><Segment range="11938-12042" color="#ffffff" type="standard"/><Q name="gene"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;i&gt;bla&lt;/i&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q></Feature><Feature recentID="8" name="pSC101 ori" type="rep_origin" swappedSegmentNumbering="1" allowSegmentOverlaps="0" consecutiveTranslationNumbering="1"><Segment range="10233-10455" color="#ffff00" type="standard"/><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;low-copy replication origin that requires the Rep101 protein&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q></Feature><Feature recentID="7" name="Î» tL3 terminator" type="terminator" swappedSegmentNumbering="1" allowSegmentOverlaps="0" readingFrame="-1" consecutiveTranslationNumbering="1"><Segment range="3129-3373" color="#ffffff" type="standard"/><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;transcription terminator &lt;i&gt;t&lt;/i&gt;&lt;sub&gt;L3&lt;/sub&gt; from phage&amp;nbsp;Î»&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q></Feature><Feature recentID="6" name="araBAD promoter" directionality="1" type="promoter" allowSegmentOverlaps="0" consecutiveTranslationNumbering="1"><Segment range="916-1200" color="#ffffff" type="standard"/><Q name="gene"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;i&gt;araBAD&lt;/i&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;promoter of the L-arabinose operon of &lt;i&gt;E. coli&lt;/i&gt;; the &lt;i&gt;araC&lt;/i&gt; regulatory gene is transcribed in the opposite direction (&lt;a href=&quot;http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/7608087&quot; title=&quot;http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/7608087&quot;&gt;Guzman et al., 1995&lt;/a&gt;)&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q></Feature><Feature recentID="5" name="Gam" directionality="1" translationMW="16346.32" type="CDS" allowSegmentOverlaps="0" consecutiveTranslationNumbering="1" hitsStopCodon="1"><Segment range="1244-1660" color="#ff0000" type="standard" translated="1"/><Q name="codon_start"><V int="1"/></Q><Q name="gene"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;i&gt;gam&lt;/i&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;protects the double-stranded DNA substrate for recombination&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="product"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;inhibitor of the host RecBCD nuclease in the&amp;nbsp;Î» Red system&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="transl_table"><V int="1"/></Q></Feature><Feature recentID="4" name="Exo" directionality="1" translationMW="25908.66" type="CDS" allowSegmentOverlaps="0" consecutiveTranslationNumbering="1" hitsStopCodon="1"><Segment range="2448-3128" color="#ff0000" type="standard" translated="1"/><Q name="codon_start"><V int="1"/></Q><Q name="gene"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;i&gt;exo&lt;/i&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;creates 3' single-stranded DNA tails&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="product"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;5' to 3' double-stranded DNA exonuclease in the&amp;nbsp;Î» Red system&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="transl_table"><V int="1"/></Q></Feature><Feature recentID="3" name="Beta" directionality="1" translationMW="29688.72" type="CDS" allowSegmentOverlaps="0" consecutiveTranslationNumbering="1" hitsStopCodon="1"><Segment range="1666-2451" color="#ff0000" type="standard" translated="1"/><Q name="codon_start"><V int="1"/></Q><Q name="gene"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;i&gt;bet&lt;/i&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;mediates pairing of a single-stranded DNA with a complementary target&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="product"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;single-stranded DNA binding recombinase in the&amp;nbsp;Î» Red system&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="transl_table"><V int="1"/></Q></Feature><Feature recentID="2" name="AmpR" directionality="2" translationMW="31557.36" type="CDS" swappedSegmentNumbering="1" allowSegmentOverlaps="0" cleavageArrows="11868" readingFrame="-1" consecutiveTranslationNumbering="1" hitsStopCodon="1" detectionMode="exactProteinMatch"><Segment range="11077-11868" color="#ccffcc" type="standard" translated="1"/><Segment name="signal sequence" range="11869-11937" color="#ccffcc" type="standard" translated="1"/><Q name="codon_start"><V int="1"/></Q><Q name="gene"><V 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name="Rep101" directionality="2" translationMW="37374.30" type="CDS" swappedSegmentNumbering="1" allowSegmentOverlaps="0" readingFrame="-1" consecutiveTranslationNumbering="1" hitsStopCodon="1"><Segment range="9235-10185" color="#993366" type="standard" translated="1"/><Q name="codon_start"><V int="1"/></Q><Q name="gene"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;i&gt;rep101&lt;/i&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="product"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;RepA protein needed for replication with the pSC101 origin&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="transl_table"><V int="1"/></Q></Feature></Features>
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  +<?xml version="1.0"?><Features nextValidID="12"><Feature recentID="11" name="SacB" directionality="2" translationMW="52961.06" type="CDS" swappedSegmentNumbering="1" allowSegmentOverlaps="0" cleavageArrows="4724" readingFrame="-1" consecutiveTranslationNumbering="1" hitsStopCodon="1"><Segment range="3390-4724" color="#993366" type="standard" translated="1"/><Segment name="signal peptide" range="4725-4811" color="#993366" type="standard" translated="1"/><Q name="codon_start"><V int="1"/></Q><Q name="gene"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;i&gt;Bacillus subtilis sacB&lt;/i&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;negative selection marker&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="product"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;secreted levansucrase that renders bacterial growth sensitive to sucrose&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="protein_id"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;br&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="transl_table"><V int="1"/></Q></Feature><Feature recentID="10" name="Shine-Dalgarno sequence" type="RBS" allowSegmentOverlaps="0" consecutiveTranslationNumbering="1"><Segment range="1227-1235" color="#a6acb3" type="standard"/><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;full consensus sequence for ribosome-binding sites upstream of start codons in &lt;i&gt;E. coli&lt;/i&gt;; complementary to a region in the 3' end of the 16S rRNA (&lt;a href=&quot;https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/7528374&quot; title=&quot;https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/7528374&quot;&gt;Chen et al., 1994&lt;/a&gt;)&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q></Feature><Feature recentID="9" name="AmpR promoter" directionality="2" type="promoter" swappedSegmentNumbering="1" allowSegmentOverlaps="0" consecutiveTranslationNumbering="1"><Segment range="7622-7726" color="#ffffff" type="standard"/><Q name="gene"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;i&gt;bla&lt;/i&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q></Feature><Feature recentID="8" name="pSC101 ori" type="rep_origin" swappedSegmentNumbering="1" allowSegmentOverlaps="0" consecutiveTranslationNumbering="1"><Segment range="5917-6139" color="#ffff00" type="standard"/><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;low-copy replication origin that requires the Rep101 protein&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q></Feature><Feature recentID="7" name="Î» tL3 terminator" type="terminator" swappedSegmentNumbering="1" allowSegmentOverlaps="0" readingFrame="-1" consecutiveTranslationNumbering="1"><Segment range="3129-3373" color="#ffffff" type="standard"/><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;transcription terminator &lt;i&gt;t&lt;/i&gt;&lt;sub&gt;L3&lt;/sub&gt; from phage&amp;nbsp;Î»&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q></Feature><Feature recentID="6" name="araBAD promoter" directionality="1" type="promoter" allowSegmentOverlaps="0" consecutiveTranslationNumbering="1"><Segment range="916-1200" color="#ffffff" type="standard"/><Q name="gene"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;i&gt;araBAD&lt;/i&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;promoter of the L-arabinose operon of &lt;i&gt;E. coli&lt;/i&gt;; the &lt;i&gt;araC&lt;/i&gt; regulatory gene is transcribed in the opposite direction (&lt;a href=&quot;http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/7608087&quot; title=&quot;http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/7608087&quot;&gt;Guzman et al., 1995&lt;/a&gt;)&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q></Feature><Feature recentID="5" name="Gam" directionality="1" translationMW="16346.32" type="CDS" allowSegmentOverlaps="0" consecutiveTranslationNumbering="1" hitsStopCodon="1"><Segment range="1244-1660" color="#ff0000" type="standard" translated="1"/><Q name="codon_start"><V int="1"/></Q><Q name="gene"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;i&gt;gam&lt;/i&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;protects the double-stranded DNA substrate for recombination&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="product"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;inhibitor of the host RecBCD nuclease in the&amp;nbsp;Î» Red system&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="transl_table"><V int="1"/></Q></Feature><Feature recentID="4" name="Exo" directionality="1" translationMW="25908.66" type="CDS" allowSegmentOverlaps="0" consecutiveTranslationNumbering="1" hitsStopCodon="1"><Segment range="2448-3128" color="#ff0000" type="standard" translated="1"/><Q name="codon_start"><V int="1"/></Q><Q name="gene"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;i&gt;exo&lt;/i&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;creates 3' single-stranded DNA tails&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="product"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;5' to 3' double-stranded DNA exonuclease in the&amp;nbsp;Î» Red system&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="transl_table"><V int="1"/></Q></Feature><Feature recentID="3" name="Beta" directionality="1" translationMW="29688.72" type="CDS" allowSegmentOverlaps="0" consecutiveTranslationNumbering="1" hitsStopCodon="1"><Segment range="1666-2451" color="#ff0000" type="standard" translated="1"/><Q name="codon_start"><V int="1"/></Q><Q name="gene"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;i&gt;bet&lt;/i&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;mediates pairing of a single-stranded DNA with a complementary target&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="product"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;single-stranded DNA binding recombinase in the&amp;nbsp;Î» Red system&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="transl_table"><V int="1"/></Q></Feature><Feature recentID="2" name="AmpR" directionality="2" translationMW="31557.36" type="CDS" swappedSegmentNumbering="1" allowSegmentOverlaps="0" cleavageArrows="7552" readingFrame="-1" consecutiveTranslationNumbering="1" hitsStopCodon="1" detectionMode="exactProteinMatch"><Segment range="6761-7552" 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ó7jÿH÷8  =  Ê   -<AlignableSequences trimStringency="Medium"/>  !<AdditionalSequenceProperties><UpstreamStickiness>0</UpstreamStickiness><DownstreamStickiness>0</DownstreamStickiness><UpstreamModification>FivePrimePhosphorylated</UpstreamModification><DownstreamModification>FivePrimePhosphorylated</DownstreamModification></AdditionalSequenceProperties>
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  7<?xml version="1.0"?><Features nextValidID="17"><Feature recentID="0" name="Rep101" directionality="2" translationMW="37375.08" type="CDS" swappedSegmentNumbering="1" allowSegmentOverlaps="0" readingFrame="-1" consecutiveTranslationNumbering="1" hitsStopCodon="1"><Segment range="9253-10203" color="#993366" type="standard" translated="1"/><Q name="codon_start"><V int="1"/></Q><Q name="gene"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;i&gt;rep101&lt;/i&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="product"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;RepA protein needed for replication with the pSC101 origin&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="transl_table"><V int="1"/></Q><Q name="translation"><V 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single-stranded DNA with a complementary target&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="product"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;single-stranded DNA binding recombinase in the&amp;nbsp;Î» Red system&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="transl_table"><V int="1"/></Q><Q name="translation"><V text="MSTALATLAGKLAERVGMDSVDPQELITTLRQTAFKGDASDAQFIALLIVANQYGLNPWTKEIYAFPDKQNGIVPVVGVDGWSRIINENQQFDGMDFEQDNESCTCRIYRKDRNHPICVTEWMDECRREPFKTREGREITGPWQSHPKRMLRHKAMIQCARLAFGFAGIYDKDEAERIVENTAYTAERQPERDITPVNDETMQEINTLLIALDKTWDDDLLPLCSQIFRRDIRASSELTQAEAVKALGFLKQKAAEQKVAA*"/></Q></Feature><Feature recentID="4" name="Exo" directionality="1" translationMW="25908.66" type="CDS" allowSegmentOverlaps="0" consecutiveTranslationNumbering="1" hitsStopCodon="1"><Segment range="2448-3128" color="#ff0000" type="standard" translated="1"/><Q name="codon_start"><V int="1"/></Q><Q name="gene"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;i&gt;exo&lt;/i&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;creates 3' single-stranded DNA tails&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="product"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;5' to 3' double-stranded DNA exonuclease in the&amp;nbsp;Î» Red system&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="transl_table"><V int="1"/></Q><Q name="translation"><V text="MTPDIILQRTGIDVRAVEQGDDAWHKLRLGVITASEVHNVIAKPRSGKKWPDMKMSYFHTLLAEVCTGVAPEVNAKALAWGKQYENDARTLFEFTSGVNVTESPIIYRDESMRTACSPDGLCSDGNGLELKCPFTSRDFMKFRLGGFEAIKSAYMAQVQYSMWVTRKNAWYFANYDPRMKREGLHYVVIERDEKYMASFDEIVPEFIEKMDEALAEIGFVFGEQWR*"/></Q></Feature><Feature recentID="5" name="Gam" directionality="1" translationMW="16346.73" type="CDS" allowSegmentOverlaps="0" consecutiveTranslationNumbering="1" hitsStopCodon="1"><Segment range="1244-1660" color="#ff0000" type="standard" translated="1"/><Q name="codon_start"><V int="1"/></Q><Q name="gene"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;i&gt;gam&lt;/i&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;protects the double-stranded DNA substrate for recombination&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="product"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;inhibitor of the host RecBCD nuclease in the&amp;nbsp;Î» Red system&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="transl_table"><V int="1"/></Q><Q name="translation"><V text="MDINTETEIKQKHSLTPFPVFLISPAFRGRYFHSYFRSSAMNAYYIQDRLEAQSWARHYQQLAREEKEAELADDMEKGLPQHLFESLCIDHLQRHGASKKSITRAFDDDVEFQERMAEHIRYMVETIAHHQVDIDSEV*"/></Q></Feature><Feature recentID="6" name="araBAD promoter" directionality="1" type="promoter" allowSegmentOverlaps="0" consecutiveTranslationNumbering="1"><Segment range="916-1200" color="#ffffff" type="standard"/><Q name="gene"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;i&gt;araBAD&lt;/i&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;promoter of the L-arabinose operon of &lt;i&gt;E. coli&lt;/i&gt;; the &lt;i&gt;araC&lt;/i&gt; regulatory gene is transcribed in the opposite direction (&lt;a href=&quot;http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/7608087&quot; title=&quot;http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/7608087&quot;&gt;Guzman et al., 1995&lt;/a&gt;)&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q></Feature><Feature recentID="7" name="Î» tL3 terminator" type="terminator" swappedSegmentNumbering="1" allowSegmentOverlaps="0" readingFrame="-1" consecutiveTranslationNumbering="1"><Segment range="3129-3373" color="#ffffff" type="standard"/><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;transcription terminator &lt;i&gt;t&lt;/i&gt;&lt;sub&gt;L3&lt;/sub&gt; from phage&amp;nbsp;Î»&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q></Feature><Feature recentID="8" name="pSC101 ori" type="rep_origin" swappedSegmentNumbering="1" allowSegmentOverlaps="0" consecutiveTranslationNumbering="1"><Segment range="10251-10473" color="#ffff00" type="standard"/><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;low-copy replication origin that requires the Rep101 protein&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q></Feature><Feature recentID="9" name="AmpR promoter" directionality="2" type="promoter" swappedSegmentNumbering="1" allowSegmentOverlaps="0" consecutiveTranslationNumbering="1"><Segment range="11956-12060" color="#ffffff" type="standard"/><Q name="gene"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;i&gt;bla&lt;/i&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q></Feature><Feature recentID="10" name="Shine-Dalgarno sequence" type="RBS" allowSegmentOverlaps="0" consecutiveTranslationNumbering="1"><Segment range="1227-1235" color="#a6acb3" type="standard"/><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;full consensus sequence for ribosome-binding sites upstream of start codons in &lt;i&gt;E. coli&lt;/i&gt;; complementary to a region in the 3' end of the 16S rRNA (&lt;a href=&quot;https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/7528374&quot; title=&quot;https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/7528374&quot;&gt;Chen et al., 1994&lt;/a&gt;)&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q></Feature><Feature recentID="11" name="SacB" directionality="2" translationMW="52961.06" type="CDS" swappedSegmentNumbering="1" allowSegmentOverlaps="0" cleavageArrows="4724" readingFrame="-1" consecutiveTranslationNumbering="1" hitsStopCodon="1"><Segment range="3390-4724" color="#993366" type="standard" translated="1"/><Segment name="signal peptide" range="4725-4811" color="#993366" type="standard" translated="1"/><Q name="codon_start"><V int="1"/></Q><Q name="gene"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;i&gt;Bacillus subtilis sacB&lt;/i&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;negative selection marker&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="product"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;secreted levansucrase that renders bacterial growth sensitive to sucrose&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="protein_id"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;br&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="transl_table"><V int="1"/></Q><Q name="translation"><V text="MNIKKFAKQATVLTFTTALLAGGATQAFA,KETNQKPYKETYGISHITRHDMLQIPEQQKNEKYQVSEFDSSTIKNISSAKGLDVWDSWPLQNADGTVANYHGYHIVFALAGDPKNADDTSIYMFYQKVGETSIDSWKNAGRVFKDSDKFDANDSILKDQTQEWSGSATFTSDGKIRLFYTDFSGKHYGKQTLTTAQVNVSASDSSLNINGVEDYKSIFDGDGKTYQNVQQFIDEGNYSSGDNHTLRDPHYVEDKGHKYLVFEANTGTEDGYQGEESLFNKAYYGKSTSFFRQESQKLLQSDKKRTAELANGALGMIELNDDYTLKKVMKPLIASNTVTDEIERANVFKMNGKWYLFTDSRGSKMTIDGITSNDIYMLGYVSNSLTGPYKPLNKTGLVLKMDLDPNDVTFTYSHFAVPQAKGNNVVITSYMTNRGFYADKQSTFAPSFLLNIKGKKTSVVKDSILEQGQLTVNK*"/></Q></Feature><Feature recentID="12" name="Cas9" directionality="1" translationMW="157887.24" type="CDS" allowSegmentOverlaps="0" consecutiveTranslationNumbering="1" maxRunOn="9010" maxFusedRunOn="9010" detectionMode="exactProteinMatch"><Segment range="4904-8990" color="#993366" type="standard" translated="1"/><Q name="codon_start"><V int="1"/></Q><Q name="locus_tag"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;br&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;generates RNA-guided double strand breaks in DNA&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="product"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;Cas9 (Csn1) endonuclease from the&amp;nbsp;&lt;i&gt;Streptococcus pyogenes&lt;/i&gt;&amp;nbsp;Type II CRISPR/Cas system&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="protein_id"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;br&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="transl_table"><V int="1"/></Q><Q name="translation"><V text="MDKKYSIGLDIGTNSVGWAVITDEYKVPSKKFKVLGNTDRHSIKKNLIGALLFDSGETAEATRLKRTARRRYTRRKNRICYLQEIFSNEMAKVDDSFFHRLEESFLVEEDKKHERHPIFGNIVDEVAYHEKYPTIYHLRKKLVDSTDKADLRLIYLALAHMIKFRGHFLIEGDLNPDNSDVDKLFIQLVQTYNQLFEENPINASGVDAKAILSARLSKSRRLENLIAQLPGEKKNGLFGNLIALSLGLTPNFKSNFDLAEDAKLQLSKDTYDDDLDNLLAQIGDQYADLFLAAKNLSDAILLSDILRVNTEITKAPLSASMIKRYDEHHQDLTLLKALVRQQLPEKYKEIFFDQSKNGYAGYIDGGASQEEFYKFIKPILEKMDGTEELLVKLNREDLLRKQRTFDNGSIPHQIHLGELHAILRRQEDFYPFLKDNREKIEKILTFRIPYYVGPLARGNSRFAWMTRKSEETITPWNFEEVVDKGASAQSFIERMTNFDKNLPNEKVLPKHSLLYEYFTVYNELTKVKYVTEGMRKPAFLSGEQKKAIVDLLFKTNRKVTVKQLKEDYFKKIECFDSVEISGVEDRFNASLGTYHDLLKIIKDKDFLDNEENEDILEDIVLTLTLFEDREMIEERLKTYAHLFDDKVMKQLKRRRYTGWGRLSRKLINGIRDKQSGKTILDFLKSDGFANRNFMQLIHDDSLTFKEDIQKAQVSGQGDSLHEHIANLAGSPAIKKGILQTVKVVDELVKVMGRHKPENIVIEMARENQTTQKGQKNSRERMKRIEEGIKELGSQILKEHPVENTQLQNEKLYLYYLQNGRDMYVDQELDINRLSDYDVDHIVPQSFLKDDSIDNKVLTRSDKNRGKSDNVPSEEVVKKMKNYWRQLLNAKLITQRKFDNLTKAERGGLSELDKAGFIKRQLVETRQITKHVAQILDSRMNTKYDENDKLIREVKVITLKSKLVSDFRKDFQFYKVREINNYHHAHDAYLNAVVGTALIKKYPKLESEFVYGDYKVYDVRKMIAKSEQEIGKATAKYFFYSNIMNFFKTEITLANGEIRKRPLIETNGETGEIVWDKGRDFATVRKVLSMPQVNIVKKTEVQTGGFSKESILPKRNSDKLIARKKDWDPKKYGGFDSPTVAYSVLVVAKVEKGKSKKLKSVKELLGITIMERSSFEKNPIDFLEAKGYKEVKKDLIIKLPKYSLFELENGRKRMLASAGELQKGNELALPSKYVNFLYLASHYEKLKGSPEDNEQKQLFVEQHKHYLDEIIEQISEFSKRVILADANLDKVLSAYNKHRDKPIREQAENIIHLFTLTNLGAPAAFKYFDTTIDRKRYTSTKEVLDATLIHQSITGLYETRIDL"/></Q></Feature><Feature recentID="13" name="rrnB T1 terminator" type="terminator" allowSegmentOverlaps="0" consecutiveTranslationNumbering="1"><Segment range="9036-9107" color="#ffffff" type="standard"/><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;transcription terminator T1 from the &lt;i&gt;E. coli rrnB&lt;/i&gt; gene&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q></Feature><Feature recentID="14" name="tetR/tetA promoters" directionality="3" type="promoter" allowSegmentOverlaps="0" readingFrame="-1" consecutiveTranslationNumbering="1"><Segment range="4813-4868" color="#ffffff" type="standard"/><Q name="gene"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;i&gt;tetR&lt;/i&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;overlapping promoters for bacterial&amp;nbsp;&lt;i&gt;tetR&lt;/i&gt; and &lt;i&gt;tetA&lt;/i&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q></Feature><Feature recentID="15" name="T7Te terminator" type="terminator" allowSegmentOverlaps="0" consecutiveTranslationNumbering="1"><Segment range="9123-9150" color="#ffffff" type="standard"/><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;phage T7 early transcription terminator&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q></Feature><Feature recentID="16" name="tet operator" type="protein_bind" allowSegmentOverlaps="0" consecutiveTranslationNumbering="1"><Segment range="4849-4867" color="#31849b" type="standard"/><Q name="bound_moiety"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;tetracycline repressor TetR&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="gene"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;&lt;i&gt;tetO&lt;/i&gt;&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q><Q name="note"><V text="&lt;html&gt;&lt;body&gt;bacterial operator O&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt; for the &lt;i&gt;tetR&lt;/i&gt; and &lt;i&gt;tetA&lt;/i&gt; genes&lt;/body&gt;&lt;/html&gt;"/></Q></Feature></Features>
   —<?xml version="1.0"?><Primers nextValidID="0"><HybridizationParams minContinuousMatchLen="10" allowMismatch="1" minMeltingTemperature="40"/></Primers>
  ž<Notes>
<UUID>635e8c27-29dc-4739-90d6-dcdc019ca297</UUID>
<Type>Synthetic</Type>
<ConfirmedExperimentally>0</ConfirmedExperimentally>
<CustomMapLabel>pKD46-Tet-Cas9-SacB</CustomMapLabel>
<UseCustomMapLabel>1</UseCustomMapLabel>
<Created UTC="10:7:8">2018.10.19</Created>
<LastModified UTC="12:8:28">2025.9.3</LastModified>
<SequenceClass>UNA</SequenceClass>
<TransformedInto>unspecified</TransformedInto>
</Notes>
  Y     K         
?????                                                                                                       ÿ d      DO  d              E              ÿÿÿÿYô? P                                                                                                                                                             c<StrandColors><TopStrand><ColorRange range="0..4930" colors="black"/><ColorRange range="4931..4931" colors="red"/><ColorRange range="4932..12085" colors="black"/></TopStrand><BottomStrand><ColorRange range="0..4930" colors="black"/><ColorRange range="4931..4931" colors="red"/><ColorRange range="4932..12085" colors="black"/></BottomStrand></StrandColors>   3<?xml version="1.0"?><EnzymeVisibilities vals=""/>
   )<?xml version="1.0"?><CustomEnzymeSets/>
